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大肠杆菌DNA/RNA生成化学试剂盒的运载条件

发布日期英文: 2023-12-07
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动物内脏、肌肉组织、血液以及培养的细胞和细菌等样本在裂解液和蛋白酶K的作用下破碎并可使大部分蛋白质变性,释放出基因组DNA。在其所提供的合适的盐离子和pH环境的作用下,与乙醇混合后,基因组DNA特异性地结合于膜上,大部分蛋白质及其他杂质在两次洗涤过程中被洗下,而DNA与膜结合牢固,在洗脱液的作用下被洗下。
本试剂盒可以从多种样本中提取基因组DNA,包括动物内脏、肌肉组织、血液以及培养的细胞和细菌等。本法基于对基因组DNA具有高度选择性的高分子膜材料,只需几个步骤即可完成提取过程,在30分钟内完成高纯度DNA的提取。
本试剂盒提取的DNA可以用于Real-time PCR、测序等分子生物学实验。
储存运输:蛋白酶K保存于2~8℃。其余成分可室温储存。保存得当可稳定使用18个月。
操作步骤:
1.将200μL上述样本和10μL蛋白酶K加入一只新的1.5mL离心管,然后加入200μL裂解液,震荡混匀5-10秒。
2.56℃温育10分钟。
3.在上述离心管中加入200μL无水乙醇,充分震荡混匀5-10秒(此步骤不可离心)。
4.将步骤4混匀的液体吸取至一只套有收集管的吸附柱上(注意不要吸到悬浮的杂质,以免阻塞吸附膜),6000-8000rpm离心1分钟,弃去管内液体。
5.将500μL去蛋白漂洗液加入吸附柱中,10000rpm离心30-60秒,弃去管内液体。
6.将700μL洗涤液加入吸附柱中,10000rpm离心30-60秒,弃去管内液体。
7.将吸附柱放回接液管上,13000rpm离心2分钟。
8.将吸附柱转移到一只干净的1.5mL离心管(不提供)中。
9.向吸附柱内加50-100μL洗脱液,室温静置1分钟,13000rpm离心1分钟,弃吸附柱,离心管中液体含有基因组DNA。提纯的DNA如果不立刻使用,请保存于-20℃。
 
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